HPLC와 굴절률 검출기를 이용한 아스코빌 글루코사이드 순도분석 사이언스21 입니다.

HPLC와 굴절률 검출기를 이용한 아스코빌 글루코사이드 순도분석

퍼킨엘머코리아(유)에서 제공한 'HPLC와 굴절률 검출기를 이용한 아스코빌 글루코사이드 순도분석'에 관한 응용자료의 주요 내용은 다음과 같다.

[사진 1]. LC300 제품사진

1. Introduction

아스코빌 글루코사이드(Ascorbyl Glucoside)는 피부 내에서 효소 작용에 의해 아스코르브산(비타민 C)과 포도당으로 분해된다. 이 분해 과정을 통해 피부에 비타민 C가 서서히 공급되면서 미백 효과를 발휘한다.

아스코빌 글루코사이드의 순도시험에 대해서는 기능성화장품 기준 및 시험방법 중에서 [별표 2]에 따른다. 일반적인 자외/가시광선 검출기로는 포도당을 분석할 수 없으므로 이 분석에는 굴절률 검출기가 장착된 HPLC 시스템을 사용하여 아스크로브산과 포도당을 동시에 분석한다. 순도시험에서 유리 아스코빅애씨드 및 유리 포도당의 함량은 각 0.1% 이하여야 규격을 만족한다.

본 실험에서는 아미노(NH2) HPLC 컬럼을 이용하여 아스코르브산과 포도당의 피크를 확인하고 실제 시료에 대해서 위 두 물질의 함량이 0.1% 이내에 있는지를 분석하였다.

2. Experimental Conditions

2-1. 분석기기

- PerkinElmer LC300 Pump

- PerkinElmer LC300 Autosampler

- PerkinElmer LC300 Column Oven

- PerkinElmer LC300 RI Detector

- SimplicityChrom Software

2-2. 분석조건

[Table 1]. LC Analytical Conditions

2-3. 표준액 및 검액 제조

- 아스코빅애씨드 20mg을 정밀하게 취하여 이동상 100mL에 녹였다 (표준원액).

- 포도당 20mg을 정밀하게 취하여 이동상 100mL에 녹였다(표준원액).

- 위의 아스코빅애씨드 표준원액 10mL와 포도당 표준원액 10mL를 취하고 이동상으로 100mL로 하여 표준액으로 하였다(표준액 농도 각 20ppm).

- 아스코빌 글루코사이드 원료 0.5g을 정밀하게 단 후, 이동상 25mL에 녹여 검액으로 하였다(검액 중 원료 농도 20,000ppm).

3. Results

3-1. 표준액 크로마토그램

[Figure 2]. 표준액 크로마토그램(20ppm, 10μL injection)

3-2. 검액 크로마토그

[Figure 3]. 검액 크로마토그램(10μL injection)

[Table 2]. 피크 면적 비교

- 검액중의 원료 농도가 2%이므로 Ascorbic Acid와 Glucose의 함량이 원료의 0.1%이하라는 규격에 적합할려면 각각의 함량은 0.002%(=20ppm)이하여야 한다. 분석 결과 각 물질의 피크면적이 표준액 20ppm의 피크면적보다 낮게 나와 원료는 순도시험에 적합한 결과를 나타내었다.

4. Conclusions

1. 기능성화장품 기준 및 시험방법에 따라 아스코르브산과 포도당을 RI 검출기를 사용하여 동시에 분석하였다.

2. 아스코르브산 및 포도당의 함량이 원료중에서 0.1% 이하임을 확인하였다.

3. 아미노(NH2)컬럼은 순도 시험에서 두 물질 분리에 적절함을 확인하였다.

‘HPLC와 굴절률 검출기를 이용한 아스코빌 글루코사이드 순도분석’에 관한 궁금한 내용은 본 원고 자료를 제공한 퍼킨엘머코리아(유)를 통하여 확인할 수 있다.

Reference(참고문헌/참고자료): 식품의약품안전처 고시(시행 2020.12.30) 기능성화장품 기준 및 시험방법

[별표 2] 피부의 미백에 도움을 주는 기능성화장품 각조 아스코빌글루코사이드

https://www.law.go.kr/행정규칙/기능성화장품%20기준 및%20시험방법

Model Name(모델명): LC300

The Person in Charge(담당자): Mi-Ry Yu

Maker(제조사): PerkinElmer

Country of Origin(원산지): USA