퍼킨엘머코리아(유)에서 제공한 'QSight 420 LC/MS/MS를 이용한 식품공전의 곰팡이 독소 4종 동시분석'에 관한 응용자료의 주요 내용은 다음과 같다.
1. Introduction
곰팡이독소는 음식과 동물 사료에서 자라는 다양한 곰팡이 종에 의해 생성되는 2차 대사산물로 사람이 일정 농도 이상에 노출될 경우 암을 유발하거나 돌연변이를 일으키는 물질로 알려져 있다. 우리나라 식품공전에서는 곰팡이독소 7종에 대한 기준을 마련하여 식품에 대한 안전 관리를 하고 있으며 특히 영·유아용 식품에 대한 기준은 일반 식품보다 매우 낮게 설정되어 있다. 유럽연합에서는 식품과 사료의 여러 곰팡이 독소에 대한 최대 허용 기준을 설정하고 있고, 미국에서는 아플라톡신, 푸모니신 및 기타 특정 곰팡이독소에 대한 조치(Action) 또는 지침 수준(Guidance levels)을 확립해 관리하고 있다.
곰팡이독소를 분석하기 위한 방법으로, Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), 박막크로마토그래피, 가스크로마토그래피, 고성능액체크로마토그래피 등 다양한 분석방법이 개발되었지만 최근에는 LC/MS/MS를 이용하여 여러 곰팡이독소를 한 번에 분석할 수 있는 방법이 널리 사용되고 있다. 우리나라 식품공전에는 HPLC-UV/FLD를 적용한 아플라톡신(B1, B2, G1 및 G2), 아플라톡신 M1, 파튤린, 푸모니신, 오크라톡신, 데옥시니발레놀, 제랄레논에 대한 개별 성분 분석방법과 LC/MS/MS를 이용한 동시분석법이 있다.
이 실험에서는 식품공전의 동시분석법에 따라 Qsight420 LC/MS/MS 시스템을 이용하여 아플라톡신(B1, B2, G1, G2), 오크라톡신 A, 제랄레논, 푸모니신(B1, B2)의 곰팡이독소 4종을 분석하여 직선성, 정밀도 및 검출한계를 테스트하였다.
2. Experimental Conditions
2-1 표준액 조제
검량선 작성을 위해 Biopure 사의 Mycotoxin 1과 3의 혼합표준원액과 오크라톡신 A, 제랄레논의 단성분 표준원액이 사용되었다. Mycotoxin Mix 1에는 아플라톡신 B1, B2, G1, G2가 포함되어 있고, Mycotoxin Mix 3에는 푸모니신 B1과 B2가 포함되어 있다. 작업표준용액은 각각의 표준원액을 0.1% 개미산을 함유한 50% 메탄올 용액을 사용하여 혼합한 후 단계적으로 희석하여 조제하였다. Table 1에 검량선 작업표준용액의 농도를 나타냈다.
2-2 분석조건
실험에 사용된 LC/MS/MS 분석 조건은 Table 2에 나타냈다. Simplicity 3Q의 Time managed MRM 기능은 각 물질의 머무름시간(RT)과 데이터수집 시간(Window)으로 MRM method를 간단하게 생성해 준다. 곰팡이독소 각 성분의 최적화된 MRM 조건은 Table 3에 나타냈다.
Table1. Analyte Concentrations(ng/mL) in Calibration Standards
Table 2. LC/MS/MS Analytical Conditions
Table 3. Optimized MRM Transitions and Parameters
3. Results
Figure 1에 가장 농도가 낮은 STD 1의 각 피크들을 나타냈다. 8개의 피크들은 검량선의가장 낮은 수준에서 모두 검출되었고, 검량선 작성 범위에서 결정계수(R2) 값이 0.995 이상으로 직선성이 양호했다(Figure 2). Table 4에는 각 성분들에 대한 정밀도(STD 4, N=5) 및 방법최소검출한계(STD 1, N=7)를 나타냈다.
Figure 1. Overlapped peaks of three ions for all analytes in STD 1.
Figure 2. Calibration curves for 8 mycotoxins.
Table 4. Precision (RSD) and Method Detection Limit (MDL) for 8 Mycotoxins (Unit: ng/mL).
4. Conclusions
1. Qsight 420 LC/MS/MS 시스템은 식품공전에 따라 곰팡이독소 4종 동시분석에 적합했다.
2. 직선성은 결정계수(R2)가 0.995 이상으로 양호했으며, 분석 정밀도는 최저농도수준에서 RSD 11% 이내, 중간농도수준에서 RSD 6% 이하로 양호했다.
‘QSight 420 LC/MS/MS를 이용한 식품공전의 곰팡이 독소 4종 동시분석’에 관한 궁금한 내용은 본 원고 자료를 제공한 퍼킨엘머코리아(유)를 통하여 확인할 수 있다.
Reference(참고문헌/참고자료): PerkinElmer Application notes
1. Multiclass-Multianalyte Method for Mycotoxin Testing in Foods Using Immunoaffinity Column Sample Clean-up with QSight LC/MS/MS.
2. A Fully Validated Method for Determination of Twelve Mycotoxins in Various Food Matrices by Stable Isotope Dilution QSight LC/MS/MS.
3. Determination of Mycotoxins in Cereals by LC-MS/MS with Online SPE.
4. Determination of Aflatoxin M1 in Milk and Infant Formula by QSight LC/MS/MS with Three Fit for Purpose Sample Preparation Methods.
Model Name(모델명): QSight 420
The Person in Charge(담당자): Wang-yu Kim
Maker(제조사): PerkinElmer
Country of Origin(원산지): USA
e-mail: wang-yu.kim@perkinelmer.com
Data Services(자료제공): PerkinElmer
<이 기사는 사이언스21 매거진 2024년 8월호에 게재 되었습니다.>
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